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豚鼠ELISA試劑盒標(biao)本(ben)要求(qiu) 1．標(biao)本(ben)采集(ji)后(hou)(hou)盡早進行提取(qu)(qu)，提取(qu)(qu)按(an)相關文獻進行，提取(qu)(qu)后(hou)(hou)應盡快進行實(shi)驗(yan)。若不能馬上進行試驗(yan)，可將標(biao)本(ben)放于-20℃保(bao)存，但應避(bi)免反(fan)復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧(yang)化物酶的（HRP）活(huo)性。
更新時間：2017-12-09
豚鼠ELISA試劑盒
試劑盒組成
| 1 | 20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 3ml×1瓶 |
| 2 | 酶標(biao)試劑 | 3ml×1瓶 | 8 | 標準品（960μg/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標包(bao)被板 | 12孔×4條 | 9 | 標準(zhun)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品(pin)稀釋(shi)液 | 3ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 3ml×1/瓶 | 12 | 密封袋(dai) | 1個 |
豚鼠ELISA試劑盒標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biao)本放于-20℃保存(cun)，但應避免(mian)反(fan)復(fu)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biao)(biao)準(zhun)品的稀(xi)釋(shi)：本試劑盒(he)提供(gong)原倍標(biao)(biao)準(zhun)品一支，用戶可按照下列圖表在(zai)小試管(guan)中進(jin)行稀(xi)釋(shi)。
| 480μg/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 240μg/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 120μg/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 60μg/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 30μg/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設空白孔（空白對(dui)照孔不加樣品及酶(mei)標試劑(ji)，其(qi)余各步操(cao)作相同）、標準孔、待測樣(yang)品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加(jia)樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品加(jia)于酶標板(ban)孔底部，盡量不(bu)觸及孔壁，輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)晃動混勻(yun)。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti)(ti)，甩(shuai)干(gan)，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色(se)15分鐘.
10. 終止：每(mei)孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定(ding)：以空白空調(diao)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止(zhi)
計(ji)算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋(shi)倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋(shi)倍(bei)數，即為樣(yang)品的實際濃度。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃(nong)洗滌液(ye)可能會有結(jie)晶析出，稀釋時(shi)可在水(shui)浴中加溫(wen)助(zhu)溶(rong)，洗滌時(shi)不(bu)影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總(zong)稀釋倍數（×n×5）。
5． 封(feng)板(ban)膜(mo)只限一次性(xing)使用，以避免交叉(cha)污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
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